(1)
Usmrtitev živali je treba izvesti tako, da povzroči živalim čim manj bolečin, trpljenja in stiske.
(2)
Usmrtitev živali mora biti izvedena v objektu, razen v primeru terenske študije. Izvesti jo mora oseba, ki je ustrezno izobražena in usposobljena v skladu s 14. členom tega pravilnika.
(3)
Uporabiti se mora metoda usmrtitve, ki ustreza živalski vrsti in starosti ter na način iz Priloge 5, ki je sestavni del tega pravilnika (v nadaljnjem besedilu: Priloga 5).
(4)
Oprema za usmrtitev živali mora biti oblikovana, grajena, vzdrževana in uporabljena na način, da se doseže hitro usmrtitev.
(5)
Pri uporabi naprave z mehanskim upravljanjem, ki prodre v možgane, je treba to napravo namestiti tako, da projektil prodre v možgane, čemur mora slediti usmrtitev s takojšnjo izkrvavitvijo, razen pri velikih plazilcih, pri katerih mora temu slediti kontuzija možganov. Pri kuncih je dovoljena uporaba penetrirnega klina za uporabo pri kuncih le, če ni na voljo drugega načina usmrtitve in če telesna masa presega 4 kg ter ji sledi takojšnja izkrvavitev živali.
(6)
Pri uporabi fizikalnega načina z udarcem po zatilju mora udarcu slediti izkrvavitev, pri dvoživkah in plazilcih pa kontuzija možganov. Pri uporabi fizikalnega načina s spremembo položaja vratnih vretenc (cervikalna dislokacija) mora temu slediti izkrvavitev. Dekapitacija je dovoljena z uporabo posebne naprave v ta namen le pri zarodkih in neonatalnih laboratorijskih glodavcih.
(7)
Dovoljena je uporaba samo registriranih splošnih anestetikov pri predhodno sediranih živalih, v prekomernem, vsaj trikratnem odmerku, ki povzroči takojšnjo izgubo zavesti, ki ji sledi smrt.
(8)
Inhalacijske anestetike je dovoljeno uporabiti samo z ustreznimi napravami.
(9)
Pri izpostavitvi živali ogljikovemu dioksidu mora biti komora, v kateri so živali izpostavljene plinu, načrtovana, izdelana in vzdrževana tako, da živalim ne povzroča poškodb ter omogoča nadzor nad njimi. Po izgubi zavesti je treba koncentracijo plina povečati na najvišjo možno raven, živali pa morajo ostati v komori še vsaj 10 minut. Temu sledi dokončna usmrtitev z uporabo ene od metod za potrditev smrti pri živalih iz Priloge 5.
(10)
Pred odstranjevanjem in shranjevanjem živalskih trupel oziroma odvzemom organov ali tkiv za delo na izoliranih organih, tkivih in celičnih kulturah za znanstvenoraziskovalno delo v raziskovalnih organizacijah in izobraževalno delo v visokošolskih zavodih je treba potrditi, da je nastopila smrt živali z eno od metod za potrditev smrti pri živalih iz Priloge 5.