Referenčne raztopine, ki se uporabljajo za preskus refraktometrov pri overjanju, so standardne raztopine saharoze ali glukoze.
Vrednosti referenčnih raztopin morajo biti določene pri referenčnih delovnih pogojih.
Merilna negotovost referenčnih raztopin, pripravljenih s tehtanjem, je lahko največ 0,02%, kadar masa raztopine presega 10 g, če je vrednost intervala na skali 1 mg in je meritev opravljena pri referenčnih pogojih.
Kadar se referenčna vrednost referenčne raztopine izmeri z etalonskim refraktometrom, se kot referenčna raztopina uporabi raztopina glukoze. Za stabiliziranje teh raztopin se uporabita izvleček (ekstrakt) gorčice (10 kapljic alil izotiocianata) in vinska kislina (3 g/L). Masni delež se določi na osnovi merjenega lomnega količnika pri 20 °C za vsako referenčno raztopino.
Etalonski refraktometer se kalibrira pri 20 °C z raztopino kemično čiste saharoze, pripravljene s tehtanjem.
Raztopine glukoze, namenjene overjanju refraktometrov, morajo biti pripravljene z merilno negotovostjo, manjšo od 0,06%. Za kalibracijo mora biti temperatura med 19 °C in 21 °C, pri čemer se korekcija naredi z interpolacijo 1/10 °C.